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      細胞分離3D基質膠套裝(不含酚紅)

      細胞分離3D基質膠套裝(不含酚紅)

      簡要描述:
      細胞分離3D基質膠套裝(不含酚紅)包含全套膠體試劑與溶解試劑,可進行3D類器官培養與微環境等相關實驗應用; 本試劑盒操作便利且可調控膠體硬度進行多種類器官培養測試;高分子膠體可快速形成水凝膠, 建議操作此培養膠體前詳讀此使用指南。(3D類器官培養基質膠材料為植物來源,無動物成分)

      更新時間:2021-10-20

      訪問量:1426

      廠商性質:代理商

      生產地址:美國


      <strong>細胞分離3D基質膠套裝(不含酚紅)</strong>

      細胞分離3D基質膠套裝(不含酚紅)產品說明

      1、貨號:B-P-00003-2、B-P-00003-4、B-P-00003-10

      2、規格:2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit

      3、儲存條件:干冰運輸,-20℃保存,可保存一年。


      一、產品描述

      Biozellen®3D類器官培養基質膠套裝包含全套膠體試劑與溶解試劑,可進行3D類器官培養與微環境等相關實驗應用; 本試劑盒操作便利且可調控膠體硬度進行多種類器官培養測試;高分子膠體可快速形成水凝膠, 建議操作此培養膠體前詳讀此使用指南。

      (Biozellen®3D類器官培養基質膠材料為植物來源,無動物成分)

      二、應用

      • 3D類器官培養。

      • 適合用于3D類器官藥物篩檢平臺

      三、適用細胞種類

      • 原代細胞

      • 干細胞

      四、細胞分離3D基質膠套裝(不含酚紅)試劑盒組分


      B-P-00003-2、B-P-00003-4、B-P-00003-10
      (對應數量和內容)

      貨號.

      Components

      Amount

      Content

      B-P-00003-A

      A 基質膠 (2X)

      4、8、20

      0.5mL / tube

      B-P-00003-C

      C 緩沖溶液 (10X)

             1、2、1

      1*10ml、2*10ml、1*50 mL / BT

      B-P-00003-D

      D 緩沖溶液 (10X)

             1、2、1

      1*10ml、2*10ml、1*50 mL / BT


      五、使用步驟:

      A.試劑制備

      A基質膠:將A基質膠溶于37℃水浴槽回溫10分鐘, 確認*融解.

      C緩沖溶液(1X)制備:使用前將10X C緩沖溶液用冰的無細胞培養液(例如: 無血清DMEM、opt-MEM) 制備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .

      D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.

      B.Biozellen®3D類器官培養基質膠的制備

      全部步驟需要在無菌環境內操作,操作步驟如下:

      1. 將24孔培養板放置于冰上預冷。
      2. 細胞計數后取 2×105~2×107 細胞與 0.5 毫升 37℃ 培養基均勻混合,并與0.5毫升37℃ A膠按照 1:1 等比例均勻混合,最終細胞密度105~107cells/mL。

      注:請選擇適當的培養溶液與條件進行試驗,貼壁細胞應在~80% 匯合度下培養。

      3.取 20-40 微升步驟 2 含細胞的混合 A 膠溶液滴于 步驟 1 預冷的培養板上,膠體將于 5 分鐘內成膠。 注: 測試膠體是否成膠,可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進行確認。

      4.待膠體成膠后,添加1毫升冰的1X C緩沖溶液,并蓋過步驟3 的膠溶液,固定 15 分鐘。

      5.待15分鐘固定后,小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細胞生長之培養基溶液。

      6將含有細胞的膠于37°C 二氧化碳培養箱內進行7~14天的培養,并觀察細胞球體的形成,按正常培養基更換頻率進行更換操作。

      C、溶膠與收集細胞球體準備程序

      小心的將培養基吸取移除,并用1X PBS進行清洗。

      小心的將 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的D緩沖溶液,蓋過膠滴于室溫反應 5分鐘。

      溫和的用1毫升移液管吸取,直到膠滴*溶解。

      將含有細胞球體的溶液吸入1.5 毫升離心管,用1000 rpm的轉速離心10分鐘,移除上清液體并收集細胞球體做分析。  

      D、收集單顆細胞準備程序

      在分離單細胞前,先按上述溶膠與收集細胞球體準備程序進行操作

      1. 添加trypsin-EDTA并與收集的細胞球體于37°C混合反應。

      2. 用1毫升移液管混合,直到細胞體*分解。

      3. 待細胞球體*分解,加入3倍體積的1X PBS,并用1000轉的轉速進行離心10分鐘,并移除上清液體收集沉淀的單細胞做分析。



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