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小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒

小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒

簡(jiǎn)要描述:
小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒用于測定小鼠血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中 C-反應蛋白(CRP)的含量。

更新時(shí)間:2024-06-26

訪(fǎng)問(wèn)量:946

廠(chǎng)商性質(zhì):代理商

生產(chǎn)地址:中國

<strong>小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒</strong>

小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒

一、產(chǎn)品說(shuō)明

貨號:MM-0074M1、MM-0074M2

規格:96T、48T

試劑盒性能:

1.樣品線(xiàn)性回歸與預期濃度相關(guān)系數 R 值為 0.95 以上。

2.批內變異系數與批間變異系數應分別小于 10%和 10% 。

檢測范圍:

7.5 ng/mL - 240 ng/mL

靈敏度:

最小低檢測濃度小于 1.0 ng/mL

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存: 2-8℃。

2.有效期: 6 個(gè)月


二、實(shí)驗原理:

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠 C-反應蛋白(CRP)水平。用純化的小鼠 C-反應蛋白(CRP)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠 C-反應蛋白(CRP),再與 HRP 標記的檢測抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng) 過(guò)*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠 C-反應蛋白(CRP)呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm 波長(cháng)下測定吸光度(OD 值),通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中小鼠 C-反應蛋白(CRP)含量。


三、小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒組成:


<strong>小鼠C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒</strong>

注:標準品濃度依次為:240、120、60、30、15、0 ng/mL.


四、樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收 集上清,保存過(guò)程中如出現沉淀,應再次離心。

2. 血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應該再次 離心。

3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過(guò) 程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時(shí),用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液, 細胞濃度達到 100 萬(wàn)/ml 左右。通過(guò)反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離 心。

5. 組織標本:切割標本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻進(jìn)行,提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。


五、操作步驟

1. 標準品的加樣:設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品 50μL;。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品最終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 加酶:每孔加入酶標試劑 100μl,空白孔除外。

4. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 60 分鐘。

5. 配液:將 20 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 20 倍稀釋后備用。

6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。

7. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色 15 分鐘.

8. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。

9. 測定:以空白孔調零,450nm 波長(cháng)依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以?xún)冗M(jìn)行。


六、注意事項:

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開(kāi)封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2. 濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結果。

3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn),最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高(樣本 OD 值大于標準品孔第一孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物請避光保存。

7. 嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9. 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準。


溫馨提示:

本產(chǎn)品提供代測服務(wù),凡購買(mǎi)本公司ELISA試劑盒的客戶(hù),均可享受免費的ELISA代測服務(wù)。詳情可詢(xún)我司在線(xiàn)客服和經(jīng)理!



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